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Beckman Coulter Trading (China) Co., Ltd
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造血幹細胞(HSC)は血液系を形成する全細胞を分化することができ、血液系を維持するために必要な細胞である。造血幹細胞は多能性幹細胞であり、自己更新の能力を持ち、階層過程を通じて様々な血球系の中期細胞を生成することができ、それによって生体血球を再生成することができる。
幹細胞棚を研究するためには、制御された条件下で細胞群が体細胞系を生成する能力を決定することができる必要がある。実験で用いた典型的な戦略は、HSCを豊富に含む骨髄を受容体マウスの血液系に移植することであり、受容体マウスの血液系は亜致死量照射後に消去される。これらのマウスでは、成体血球および幹細胞、前駆体細胞はいずれも照射2週間後に死亡する。移植された細胞は新しい血液系を分化させ、マウスを救うことができる。
HSCは、その短期(ST−HSC)、*(LT−HSC)、及び中期(IT−HSC)再構築能力に基づいて再分裂を達成することができる[1,2]。ほとんどの報告では、移植術後16〜44週間の異なる時点で循環単核細胞、顆粒細胞、リンパ球を生成する能力を測定することにより、LT−HSCを決定した。移植後細胞に対する次競争的分析は移植術後4〜6週間後に行うべきである。移植研究では、野生型近交C 57/BL 6マウスが一般的に用いられているが、これらのマウスはPtprcb白血球マーカー(CD 45.2/Ly 5.2)等位遺伝子を持っていることを前提としている。Sloan Ketring研究所はSJLマウスと野生型C 57/BL 6マウスを回交することにより、C 57 BL/6-Ly 5.1と呼ばれる同類品系マウスを育成した。これらのマウスはPtprcb白血球マーカー(CD 45.1/Ly 5.1)対立遺伝子を持っていた。よく使われる抗CD 45.1とCD 45.2抗体を使用すると、研究者は宿主と移植細胞を容易に同定し、競争的な実験におけるHSCの役割を決定することができる。本文では、照射マウスを移植した後、その末梢血中のCd 45.2−ドナーとCD 45.1−宿主白血球を測定する簡単な実験を概括的に述べた。
(著者:John F.Woolley,PhD 1,2 Leonardo Salmena,PhD 1,2
所属:1.カナダ・トロント大学・薬理学・毒理学部2.カナダ・トロント・大学健康ネットワーク・マカレー王女がんセンター)