お客様のご来店を歓迎します!

会員資格

助け

Beckman Coulter Trading (China) Co., Ltd
カスタム製造元

主な製品:

mechb2b>記事

Beckman Coulter Trading (China) Co., Ltd

  • メール

    beckman-lq@ins-interactive.cn

  • 電話

  • 住所

    上海市長寧区福泉北路518号2基5階

すぐに連絡する
レートゾーン遠心分離法|あなたの分離精製方法は正しいですか?
日付:2022-06-02読み:1

密度勾配遠心(isodensity centrifugation method)はゾーン遠心とも呼ばれる。

この方法の長所サンプル中のいくつかまたはすべての成分を同時に分離することができ、良好な分解能を持ち、分離効果がよく、一度に比較的純粋な成分を得ることができる。

欠点遠心分離時間が長く、勾配液を調製する必要があり、操作要求が高い。

遠心分離原理によれば、密度勾配遠心はまたレートゾーン遠心分離法(レートゾーン遠心分離法、R−Z)和とうみつどえんしんほう (等密度遠心分離法)

レートゾーン遠心分離は、等価ゾーン密度遠心分離とも呼ばれ、サンプル中の異なる成分粒子が有する異なる体積サイズと異なる沈降係数に基づいて混合サンプルを遠心分離精製する。

遠心分離時に分離する必要がある試料溶液を、ショ糖、塩化セシウム(CsCI)、*などの密度勾配材料で形成された勾配液柱の上に配置し、試料粒子の密度は勾配液柱のいずれかの密度より大きくなければならず、理想的なゾーン遠心分離効果は得られない。遠心分離すると、混合サンプル中の異なる成分が勾配液柱の異なる位置にそれぞれのゾーンを形成し、適切な回転速度と時間を選択して遠心分離し、各ゾーンが距離を遠くに引いたときに遠心分離を終了し、ゾーンを取り出す。これにより、混合試料中の各成分を1回の遠心分離により分離精製することができ、その純度と回収率はいずれも要求を満たすことができる。

長所一次分離精製であり、成分の沈降係数が20%以上異なるものはこの方法を選択することができ、分解能力が高く、操作が熟練しているため、成分の沈降係数が5%〜10%異なるサンプルをよく分離することができる。

欠点材料の条件の制限であり、試料液濃度は高すぎてはならず、そうしないと操作条件の制御が困難であると同時に、この方法は差速遠心法に比べて、処理試料の量はずっと小さい。


図1レートゾーン遠心分離

レートゾーンが遠心分離する時間は厳格に制御しなければならず、短すぎてはならない。そうしないと、サンプルゾーンがはっきりしないし、時間も長すぎてはならない。そうしないと、分離される成分が沈下する可能性がある。分離が必要なサンプル粒子の沈降速度は、粒子の形状、大きさ、密度、遠心力などの要素に依存する。遠心分離前後のサンプルの状態を図1に示す。

レートゾーン帯遠心経典の応用はショ糖密度勾配遠心により、各種サブ細胞器(リボソーム、ミトコンドリア、Exosomeなど)とウイルス粒子(ウイルスベクター、ワクチンなど)の精製を行うことである。例えば、私たちは前号で得られた70 Sリボソーム沈殿物を加水分解した後、ショ糖密度勾配を利用して遠心分離し、さらに分離精製して50 Sと30 Sの2つのサブユニットを得ることができる。具体的な実験の流れは以下の通りである:

640.gif

遠心教室は連載中で、遠心方法の詳細に注目し続けています!

過去の遠心分離教室に注目する

遠心分離の一般的な用語-遠心力と相対遠心力

一般的な用語の沈降係数

速遠心法による無外分泌体血清の調製

ヘッド効率K因子と遠心時間

差速遠心法|あなたの分離精製方法は正しいですか?

実験室の滅菌の悩み、小貝商城は5割引で解決します!

*承認番号:RA-051-cent-adv-ruo

*改訂日:2020/10/16

*声明:承認されていない場合は修正を行うことはできません。ベックマンクルトは予告なしに随時バージョンを更新する権利を保持しています