要約

製造プロセスは、新規に合成された化合物から候補化合物またはパイロット化合物を選択的にスクリーニングしたり、薬物中の不純物、天然物質中の特定の機能を有する成分の構造解析に用いたりするなど、多くの分野に広く応用されている。調製型超臨界流体クロマトグラフィー（略称調製SFC）は分析時間が短く、後処理が簡単であるなどの利点があり、医薬工業や多くの他の分野で広く応用されている。キラル異性体の分離のようなクロマトグラフィーピーク数の限られた分析に対して、「反復添加サンプル」は製造精製の効率を高めることができる。このレポートでは、Nexera UCを使用した超臨界流体クロマトグラフィーの「反復注入」機能を使用して製造作業効率を向上させた例を説明します。

キーーワード：調製型SFC、反復注入サンプル

1使用するSFCにより分析時間を短縮

超臨界二酸化炭素の低粘度と高拡散係数により、高流速でも、SFCのカラム圧も低い。これは、カラム効果を犠牲にすることなく分析速度を高めることができることを意味します。そのため、その分析時間は高効率液体クロマトグラフィーよりずっと短い。

*のキラル分離を例に、製造LCとSFCの製造に要する時間の比較図1に示すように、SFCの製造に要する時間は製造型LCの消費時間の1/4にすぎず、分析効率を向上させた。

図1 HPLCとSFCの＊キラル分割の比較（作成タイプ）

表1分析条件

2はんぷくおくりがた

反復加算サンプルは、SIL-40自動注入器とFRS-40留分収集器の連続注入技術は、クロマトグラフィーピークが保持されている時間間隔を利用して連続的に注入することにより、分析時間を節約して分離効率を向上させ、その動作原理を図2に示す。反復サンプリング設定を行う際には、次の点に特に注意する必要があります。

• 等度解析のみ

• クロマトグラフィーピーク同士が重なり合うことはありません

図2反復サンプリングの動作原理

3反復サンプリング設定方法

反復サンプリング機能は、LabSolutionsワークステーションソフトウェアで簡単に設定できます。「注入間隔」、「注入回数」、「次の前処理待ち時間」などのパラメータ（図3）を設定し、所与の注入間隔の結果を単一運転結果（クロマトグラム）を用いてシミュレーション（図4）することで、クロマトグラムのピークオーバーラップの有無を容易に確認することができる。連続注入を行うには、サンプルリング（図5）からサンプルが流出した後、サンプルリングがLOAD状態（図5の右側）に戻るように適切な待ち時間を設定する必要があります。

図.3「反復サンプリング」パラメータの設定（図4用）

図4「反復サンプリング」シミュレーション結果（LabSolutions）

図5サンプルバルブ動作（FRS-40）

データ収集時間の場合は、1回の分析時間より長く、注入間隔と注入回数を加えた積を入力します。たとえば、0.8分間の注入間隔を9回連続して注入すると、入力値は少なくとも1回の分析時間に7.2分加算される（図6）。

図6データ収集時間（SPD-M 40）

各注入サイクルの後、分留弁をその初期位置に戻すと、同じボトルに同じピークを集めることができる。したがって、「繰り返し注入」方法は、同じ化合物のすべてのピークを同じ収集瓶に収集することができる。留分収集は時間プログラムに基づいて行われ、単回分析の時間プログラムを入力するだけで、ワークステーションは自動的に注入間隔に基づいて留分収集時間を計算することができる（図7と8）

図.7「反復注入」のリセット時間

図8リセット時間と製造間隔の関係

4キラルサンプル分離のための「反復添加サンプル」

次に、実際の使用方法を説明します「反復添加試料」によるキラル薬物の分離例は、サンプルは10 mg/mL*溶液（メタノール）。分析条件を表2に、得られたクロマトグラムを図9に示す。結果により、10.5分間の分析時間内に、注入回数は通常の注入の3回から「繰り返し注入」の9回に増加することができ、製造操作の効率を高めた。

表2分析条件

図9*分離の例