食品中のfolic acid*免疫親和性カラムIAC-SEP

食品中のfolic acid*免疫親和性カラムIAC-SEP

IAC-SEP®*免疫親和柱

（品番：IAC 322）

オブジェクトの操作

IAC-SEP®*親和柱特異的に精製できるサンプル中の*，それは柱状アガロースゲルを固相担体として採用し、アガロースゲルは*抗体と結合して免疫吸着剤を形成し、カラムを入れて免疫親和カラムを作製した。それはサンプル中の*を特異的に精製することができる。*親和柱は飲料、牛乳、穀物などのサンプルの抽出に広く応用されており、この方法は速度が速く、操作が簡単で、正確性が高く、食品の品質と安全性を高めるのに非常に重要な役割を果たしている。

原理

*免疫親和性カラムが特異的に精製できるサンプル中の*，サンプルを抽出液と混合し、抽出し、濾過した後、濾液を免疫親和カラムに通した。この時点で、*物質親和性カラム中の抗体に結合する。免疫親和柱上の不純物を蒸留水で除去した。溶離液を用いて分離カラムを通過し、抗体から＊を分離した。その後、溶離液をHPLCまたはLC-MSに注入して測定した。

ちょぞうじょうけん

この親和柱は2-8°C条件下で保存され、冷凍できず、賞味期限は18ヶ月であった。室温（18-30°C）での使用を推奨。

実験溶液の調製

pH7.4 PBSようえき：8.0 NaCl+2.90 gのNa 2 HPO 4 12 H 2 O+0.24 gのKH 2 PO 4+0.2 gのKClを990 mLの純水で溶解し、純水を1リットルまで加えた。

10%アスコルビン酸ナトリウム：L-アスコルビン酸ナトリウム100 mL容量ボトル10 gを秤量し、水を加えて溶解し、よく混ぜた。

溶離液（30%アセトニトリル＋0.2%トリふっ化酢酸）：正確に30 mLアセトニトリルを取って100 mL容量瓶に入れ、それから0.2 mL三ふっ化酢酸、その後純水で100 mLに定容する。

必要なその他の試薬：（シグマP1750）

液体クロマトグラフィー条件

カラム：Agilent-C 18、4.6×150 mm（5 um）

移動相：0.1%3ふっ化酢酸：アセトニトリル＝85：15（v/v）

流速：0.5 mL/min

検出器：紫外線検出器、280 nm

注入体積：50 uL

解析手順

1）サンプル抽出及び希釈：

乳児用調合食品、乳児用レトルト食品、牛乳、粉ミルク、穀物、エネルギー棒などのサンプルの操作手順：秤取1-10gサンプル（必要な検査範囲に応じて計量量を決定する）は、250ミリリットルテーパーボトルをオフにします。50mL pH7.4 PBSようえきに参加テーパボトルで、混ぜます。加入4G*、ロッキングベッドが10分間揺れます。加入6mL 10%アスコルビン酸ナトリウム、揺動床を5分間震動させた。テーパボトルを37℃の水浴ロッカに2時間置いて振動させた後、テーパボトルを100℃の水浴中に20分間静置した。コーンボトルを取り出して室温まで冷却する、用いるpH7.4 PBSようえき許容範囲100mL、均等に振る。抽出液を4000 回転分遠心分離10 min。上層液10 mLを正確に吸引、予備。

2）サンプルの浄化

*免疫親和性カラムのカラム容量（吸着*）は450ng、サンプル中の*が測定範囲を超えた場合、上部柱の体積を適切に減少させ、測定範囲内にして正確な含有量を計算してください。

食品中のfolic acid*免疫親和性カラムIAC-SEP