NEB M 0202 S T 4 DNAリガーゼ20000 U

特性

■粘性末端と平端を効率的に接続する
■T/Aクローン
■dsDNA切断修復
■高濃度クローンライブラリーの構築
■RNAとDNAの接続

NEB M 0202 S T 4 DNAリガーゼ20000 U

概要

酵素は二本鎖DNAまたはRNA上の隣接する5’−リン酸末端および3’−ヒドロキシル末端を触媒してリン酸ジエステル結合を形成する。この酵素は、整列末端または粘性末端間の結合を触媒するだけでなく、二本鎖DNA、RNAまたはDNA/RNAハイブリダイゼーション二本鎖中の一本鎖切断を修復することができる。

ソース

精製E.コリC600 pcl857 pPLc28 lig8。

はんのうじょうけん

1 X T 4 DNAリガーゼ反応緩衝液
[50 mM Tris-HCl（pH 7.5 @ 25℃），10 mM MgCl2，10 mM DTT，1 mM ATP]。＊DNA 5’末端濃度は0.1〜1.0μM、16℃でインキュベートした。
熱失活：65℃で10分間。

単位定義（粘性末端活性単位）

1単位とは、20μlの1 X T 4 DNAリガーゼ反応緩衝液中、16℃反応条件下で、30分間に50%のHind III消化されたλDNA断片［5’末端濃度0.12μM（300μg/ml）］を結合させるために必要な酵素量を指す。

濃度

400000 units/mlと2000000 units/ml。

注意事項

とE.コリDNAリガーゼにはNAD+作補因子が必要であり、T 4 DNAリガーゼの補因子はATPである。

希釈したT 4 DNAリガーゼは、−20℃、50%グリセリン貯蔵緩衝液（希釈緩衝液A、NEB＃B 8001）に保存しなければならない。希釈後すぐに使用する場合は、1 X T 4 DNAリガーゼ反応緩衝液で希釈することもできる。

結合反応は、反応系にATPを1 mMATP添加するだけで、NEBに提供される4種類の制限的エンド酵素緩衝液または

T 4 DNAポリヌクレオチドキナーゼ反応緩衝液中で行った。

T 4 DNAリガーゼ

商品番号

規格

価格

北京在庫

上海在庫

#M0202L

100,000ユニット

ある

ある

#M0202M

（高濃度5 X）100000 units

ある

ある

#M0202S

20,000ユニット

ある

ある

#M0202T

（高濃度5 X）20000 units

ある

ある

#M0202V号

10,000ユニット

ある

ある